转基因系统 Gene Tranfer——PDS-1000/HE台式基因枪系统


Biolistic PDS–1000/He 基因枪系统主单元。主转化室(右)包括微粒发射装配和轰击氦压力计(上)。中央测量计(左)监控转化室内的真空状态,下面两个旋钮用于调节真空流和排气速率。
Biolistic PDS–1000/He 基因枪系统将微米大小的、包被有核酸的金或钨微粒加速到所需要的速度,从而将基因导入细胞、组织或器官。这一过程既不依赖也不作用于细胞表面。系统利用高压氦气的轰击,来推动携带有微粒的塑料大颗粒载体盘朝目标细胞方向加速。推进大颗粒载体的氦气压力由所使用的不同破裂盘决定。破裂盘是一种可在特定压力下破裂的塑料密封体。终止屏可阻止大颗粒载体,使微粒可以通过和转染靶细胞。为了提高这一进程的效率,可抽空转化室,使压力低于大气压力,从而当微粒打向靶细胞时可减少其摩擦阻力。
Biolistic PDS–1000/He 系统能提供:
- 一种可重复的、转化完整培养细胞的方法,几乎无需对细胞进行处理
- 用其它方法不能完成的,有特殊生长需要的细胞转化
- 实验过程的最大控制
- 高重复性
轰击参数*
| 细胞类型 | 真空 (inches Hg) |
目标间距 (cm) |
氦气压力 (psi) |
颗粒大小 |
| 细菌 | 29 | 6 | 1,100 | M5 钨 |
| 酵母菌 | 28 | 6 | 1,300 | 0.6 µm 金 |
| 藻类 | 29 | 6 | 1,300 | 0.6 µm 金 |
| 植物 | ||||
| 胚芽 | 28 | 6 | 1,300 | 1.0 µm 金 |
| 愈伤组织或愈伤组织或 | 28 | 9 | 1,100 | 1.0 µm 金 |
| 细胞器 | 28 | 6 | 1,300 | 0.6 µm 金 |
| 动物 | ||||
| 组织培养 | 15 | 3 | 1,100 | 1.6 µm 金 |
| 组织切片 | 25 | 9 | 1,100 | 1.6 µm 金 |
* 我们推荐这些设定作为多种细胞类型的起始轰击参数。许多因素会影响轰击效率,但对于多数用户来说,分别优化主要变量再小幅调整以测试它们的相互影响,就足以获得满意的结果。
PDS–1000/He Hepta 适配器
PDS–1000/He 基因枪系统加上Hepta 适配器后,可以比标准系统多转化7–10 倍的细胞。它配接PDS– 1000/He 系统的冲击室,将氦气冲击波分导至7 个大颗粒载体处。这样,通过在更大面积上均一地分散DNA 包被的金粉或钨粉,增加了这个系统一次轰击的细胞数。当氦气被分成7 道时,降低了压力和颗粒速度,该系统特别适合不太需要强大穿透力的植物和培养细胞。

| 目录 # | 描述 |
| 165-2225 | Hepta Adaptor for PDS-1000/He System, includes 5 stopping screens |
| 165-2248 | PDS-1000/He Lease-to-Purchase Conversion, to purchase unit upon lease expiration |
| 165-2256 | Particle Delivery Research License, allows multiple users to access biolistic technology; research license is included in lease or purchase |
| 165-2257 | PDS-1000/He System, includes helium pressure regulator, solenoid, spacer rods, microcarrier launch assembly, target shelf, 5 macrocarrier holders, tubing, instructions |
| 165-2258 | PDS-1000/He Hepta System, includes helium pressure regulator, solenoid, spacer rods, microcarrier launch assembly, target shelf, 5 macrocarrier holders, tubing, Hepta adaptor, instructions |
| 165-2259 | Voltage Converter, for 220 V or 240 V line voltage |
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